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首页上指标的测量方法。天津浮游植物检测叶绿素的测量方法
所有绿色植物都含有用于光合作用的色素。因此,测定水样中色素的含量也是天津浮游植物检测的一种定量方法。
虽然每门藻类的色素组成不同,但都含有叶绿素a,叶绿素a不仅含量高,而且是整个光合作用过程中最重要的能量传递中心。因此,叶绿素a值主要作为衡量浮游植物检测蓄积量的指标。
与计数法相比,叶绿素测定方法简单、速度快,已成为测定浮游植物检测常备存储量的常用方法。同时,叶绿素值也可以通过某些转换来指示初级生产的大小。
1、水样采集
为测量叶绿素而收集水样的方法与测量浮游植物检测数量的方法相同。收集的水样可以根据水中浮游植物检测的数量来确定,通常在0.5到2升之间。如果浮游植物检测含量特别低,则需要增加水样的数量。
2、水样保存
将水样注入瓶中后,应避免阳光直射,置于荫凉处。如果进一步处理水样需要较长时间(如隔天),应低温(- 4℃)保存,并加入1%碳酸镁悬浮液,每升水样加入1ml,防止酸化。
3、吸滤
安装过滤设备——包括砂芯过滤装置(直径50mm)、过滤瓶、负压表、真空泵等。将过滤膜放入过滤器中。滤膜采用玻璃纤维滤膜或混合纤维酯类微孔滤膜(孔径为0.8微米)。前者过滤速度快,当需要过滤大量水样时应优先使用。如果水样中没有添加碳酸镁溶液,则应在滤膜上过滤约0.5-1毫升碳酸镁溶液,以防止酸化。过滤时的负压不应超过0.5个大气压(50千帕)。
过滤完成后,用镊子小心地将滤膜取下,对折(浮游植物检测样品侧面朝内),然后用普通滤纸尽可能多地吸收和去除滤膜上的水分。如果不能立即提取,过滤膜应在黑暗和低温条件下保存。可在普通冰箱冷冻室保存数天;在-20℃低温冰箱中可保存30天。
4、提取
样品先研磨,以提高色素提取效果。研磨可以使用玻璃砂浆或玻璃均质器。将滤膜切成小片,放入砂浆或均质器中,加入7-8毫升萃取剂,研磨几分钟。将研磨好的匀浆转移到带塞子和刻度的离心管中。用少量萃取剂冲洗砂浆或均质器,并将冲洗液合并到离心管中,直到最终体积略小于10毫升。将管道塞盖好,摇一摇,再置于黑暗、低温区域。
提取溶液可以是90%丙酮、90%或100%甲醇、90%乙醇等。最常用的是丙酮。近年来,国际相关专家进行了研究和实验,从提取效率、安全、健康等方面考虑,建议今后不应使用丙酮,而应使用乙醇作为萃取剂。多年来,丙酮在中国使用较多,考虑到数据的可比性,仍然可以继续使用。
提取时间应不少于6小时(乙醇或甲醇)或20小时(丙酮),且不超过24小时。
5、离心机
将含有提取液的离心管放入离心机中,以3500-4000转/分的速度离心10-15分钟。将上层叶绿素萃取清液转入定量试管中,再用少量丙醇悬浮沉淀,离心得到萃取清液。重复1-2次。最后,将提取物稀释至10毫升。
6、光密度测量
读取波长为665纳米和750纳米的光密度,以比色米为单位,具有一定的光程(1-3厘米)。在750纳米处的光密度被用来校正吸收值。
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